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Milieux De Culture Déshydratés

ROTHE (BOUILLON DE)

CODE : CM0868

Milieu pour la détection des streptocoques fécaux dans l’eau.

COMPOSITION

(grammes/litre)

Peptone 20,0
Glucose 5,0
Chlorure de sodium 5,0
Hydrogénophosphate de potassium 2,7
Dihydrogénophosphate de potassium 2,7
Azoture de sodium 0,2
pH 6,8 ± 0,2  

500 grammes permettent de préparer 14 litres de milieu.

PREPARATION
Verser 35,6 g de poudre dans un litre d’eau distillée pour un bouillon simple concentration ou 71,2 g de poudre pour un bouillon double concentration. Chauffer doucement jusqu’à dissolution complète. Répartir et stériliser à 121°C pendant 15 minutes à l’autoclave.

DESCRIPTION
Le bouillon de Rothe est utilisé pour la détection des streptocoques fécaux dans l’eau1.
La présence de streptocoques fécaux indique une contamination fécale. Les streptocoques fécaux sont de meilleurs indicateurs de pollution des eaux chlorées que les E. coli car ils offrent une meilleure résistance au chlore.
Malmann et Seligmann2 recommandent le bouillon de Rothe pour la quantification des streptocoques dans l’eau, les aliments et autres matières suspectées de contamination par les eaux d’épandage.
L’alliance peptone/glucose rend le bouillon de Rothe extrêmement nutritif et le chlorure de sodium maintient l’équilibre osmotique. L’intérêt de l’azoture de sodium comme inhibiteur des germes Gram – a été signalé par de nombreux utilisateurs2,3,4 et la concentration choisie apporte une protection optimale pour les streptocoques fécaux, tout en supprimant largement la flore Gram –. Le système de tampon phosphate maintient un pH stable.

UTILISATION
Inoculer 10 ml de milieu avec 1 ml de l’échantillon à tester. Inoculer 3 autres tubes avec respectivement 0,1 ml, 0,01 ml et 0,001 ml d’échantillon. Pour les échantillons de 10 ml ou plus, utiliser un bouillon double concentration. Incuber tous les tubes à 37°C et examiner la turbidité après 24 et 48 heures. Pour une description plus détaillée, se reporter aux “Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater”1.
La présence de streptocoques fécaux dans l’échantillon est indiquée par la turbidité du bouillon. Les cultures positives devront être inoculées dans un bouillon de confirmation des streptocoques fécaux.

CONSERVATION
Conserver le milieu déshydraté à 10–25°C jusqu’à la date de péremption indiquée sur le flacon.
Conserver le milieu prêt à l’emploi à 2–8°C.

CONTROLE DE QUALITE
Contrôle positif :
Enterococcus faecalis ATCC® 29212
Contrôle négatif :
Escherichia coli ATCC® 25922

PRECAUTIONS
Ce produit contient moins de 1 % d’azoture et présente une faible toxicité. Cependant, il convient de porter des gants, un masque et de se protéger les yeux lors de la manipulation de la poudre.
Lorsque des produits contenant de l’azoture sont lavés dans un évier, il est nécessaire d’utiliser suffisamment d’eau pour éviter l’accumulation d’azoture dans les tuyaux.

BIBLIOGRAPHIE
1 Greenberg A.E. et al. (ed.) (1985), Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 16th ed. APHA,
Washington, D.C.

2 Mallmann W.L. and Seligmann E.B. (1950), Am. J. Public Health 40, 286.
3 Edwards S.J. (1933), J. Comp. Path. Therap., 46, 211.
4 Hartman G. (1937), Milchw. Forsch., 18, 166.


 
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