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CODE : CM0983

Milieu pour le pré-enrichissement sélectif de Campylobacter dans les échantillons alimentaires.

500 g permettent de préparer 18,1 litres de milieu.

SUPPLEMENT DE BOLTON

CODE : SR0183

SUPPLEMENT DE BOLTON MODIFIE

CODE : SR0208

PREPARATION
Dissoudre 13,8 g de bouillon de Bolton (CM0983) dans 500 ml d’eau distillée. Stériliser 15 minutes à 121°C à l’autoclave. Refroidir à 50°C. Ajouter stérilement 25 ml de sang de cheval laqué (SR0048) et un flacon de supplément sélectif de Bolton (SR0183 ou SR0208) reconstitué suivant les instructions. Bien mélanger et répartir.

DESCRIPTION
Le bouillon d’enrichissement sélectif de Bolton contient des agents nutritifs et aide à la revivification des germes stressés. Sa formule permet d’éviter l’emploi d’une atmosphère microaérobie. Le type d’incubation – 30 ou 37°C – dépend du type d’aliment analysé. Après le pré-enrichissement, la température d’incubation est montée 42°C afin d’accroître la sélectivité sur la flore compétitive.
Le milieu contient du pyruvate de sodium et du métabisulfite de sodium. Ces 2 ingrédients inhibent les composés toxiques produits dans le milieu.
Les antibiotiques contenus dans les suppléments sélectifs (SR0183 et SR0208) optimisent la sélectivité pour les Campylobacter spp.
La vancomycine agit contre les Gram (+), la céfopérazone contre les Gram (-) et le triméthoprime contre les Gram (-) et les Gram (+).
Le cycloheximide agit contre les levures.

UTILISATION
Ajouter 25 g d’échantillon alimentaire dans 225 ml de bouillon d’enrichissement sélectif et homogénéiser à l’aide d’un stomacher. Le bouillon de Bolton ne nécessite pas d’incubation en microaérobie mais doit être utilisé en flacons fermés, en laissant un espace de 20 mm maximum entre le liquide et le haut du flacon. Incuber pendant 4 heures à 37°C, puis incuber de nouveau à 42°C. Une subculture après 24 à 48 heures peut être effectuée soit sur le milieu CCDA modifié (CM0739 + SR0115), soit sur le milieu de Preston (CM0689 + SR0117 + SR0048).

CONSERVATION
Conserver le milieu déshydraté à 10-25°C jusqu’à la date de péremption indiquée sur le flacon.
Le milieu prêt peut être conservé à 2-8°C jusqu’à 2 semaines.

CONTROLE QUALITE
Contrôle positif :
Campylobacter jejuni ATCC 29248
Contrôle négatif :
Escherichia coli ATCC 25922

BIBLIOGRAPHIE
1 National Advisory Committee on Microbiological Criteria for Foods (1193). Journal of Food Protection 57 : 1101-1121.
2 Skirrow, M.B. (1977). British Medical Journal 2 : 9-11.
3 Post, D.E. (1995). Food-Borne Pathogens Monograph Number 3 Campylobacter.
4 Bolton, F.J. (1995) Personal communication.
5 Hunt, J.M. (1998) Campylobacter. In : F.D.A. Bacteriological Analytical Manual, 8th Edition (Revision A) 7.01-7.27. AOAC, Arlington Va.