Oxoid - Product Detail

DRYSPOT CAMPYLOBACTER DRYSPOT

CODE : DR0150

Test d’agglutination au latex pour l’identification des Campylobacter entéropathogènes à partir de colonies. Campylobacter jejuni, C. lari, C. coli donnent un résultat positif. Les autres Campylobacter tels que C. upsaliensis et C. fetus donnent un résultat variable.

COMPOSITION DU COFFRET
Coffret de 50 tests
DR0151M Cartes de réaction portant le réactif déshydraté. Zone test : particules de latex bleu sensibilisées par des anticorps de lapin dirigés contre des antigènes de surface sélectionnés de Campylobacter Zone de contrôle : particules de latex bleu sensibilisées par des anticorps de lapin non spécifiques des Campylobacter. 10 sachets plastique scellés contenant chacun 5 cartes de réaction et un dessicateur. Chaque carte comporte 1 zone test et 1 zone de contrôle.
Au total 50 tests.
DR0152M
Réactif d’extraction A Solution d’acide acétique (1,2 M)
DR0153M Réactif d’extraction B Réactif neutralisant constitué d’un tampon glycine contenant de l’azoture de sodium à 0,09 % utilisé comme conservateur.
DR0154M Contrôle positif Il est constitué d’un extrait de Campylobacter neutralisé par l’acide dans un tampon contenant 0,09 % d’azoture de sodium utilisé comme conservateur.
DR0699M
Pastettes
DR0155M
Sacs de conservation
Fiche technique

PRINCIPE
Les Campylobacter sont des bactéries hélicoïdales ou incurvées, Gram négatif, oxydase positive, en forme de bâtonnet.¹ Ils ont été isolés chez l’homme et les animaux ainsi que dans l’environnement.
L’augmentation des recherches de Campylobacter en routine a montré qu’ils étaient fréquemment en cause dans les diarrhées. L’infection a été associée à la consommation de nourriture ou d’eau contaminées, en particulier les volailles et le lait non pasteurisé.
Les méthodes actuelles pour l’isolement et la culture des Campylobacter ont été récemment passées en revue.²
Le Test Campylobacter Dryspot consiste en des particules de latex bleu sensibilisées par des anticorps de lapin dirigés contre des antigènes de surface sélectionnés de Campylobacter. Le réactif de contrôle est constitué de particules de latex bleu sensibilisées par des anticorps de lapin non spécifiques des Campylobacter.
Les réactifs au latex sont déshydratés sur des cartes de réaction. Lorsqu’un extrait de Campylobacter est mélangé avec le réactif test, il apparaît une agglutination due à une réaction entre le latex sensibilisé par les anticorps et les antigènes de Campylobacter. Si l’extrait ne contient pas les antigènes de Campylobacter, aucune agglutination n’apparaît et le résultat est négatif.
Le Test Campylobacter Oxoid Dryspot contient les réactifs pour l’extraction de l’antigène et un contrôle antigénique positif.

MODE D’EMPLOI
A. Recueil des échantillons et préparation
Pour plus de détails sur le recueil et le traitement des échantillons, consulter les procédures standard.
Les colonies dont la morphologie suggère un Campylobacter peuvent être testées à partir de n’importe lequel des milieux sélectifs pour Campylobacter suivants : gélose de base pour Campylobacter, gélose Columbia au sang et gélose au sang n°2 avec les suppléments sélectifs de Butzler, Blazer-Wang, CCDA, Preston ou Skirrow.
Les colonies doivent être testées après environ 48 heures d’incubation.
B. Mode opératoire
1. Retirer les réactifs du réfrigérateur et les laisser revenir à température ambiante (18-25°C).
2. Placer un tube sur un portoir.
3. Déposer une goutte de réactif d’extraction A dans le tube.
4. Prélever suffisamment de colonies suspectes pour remplir la boucle d’une oese. Mettre ces germes en suspension dans la goutte de réactif A. Laisser l’oese 3 minutes en contact avec le réactif A. Ne pas la jeter.
5. Ajouter 2 gouttes de réactif d’extraction B. Bien mélanger à l’aide de l’oese précédemment utilisée.
6. A l’aide d’une pastette, déposer 1 goutte (50 µl) de l’extrait neutralisé sur le cercle test et 1 goutte sur le cercle de contrôle.
7. A l’aide de la partie plate de la pastette, mélanger l’extrait et le réactif de contrôle déshydraté jusqu’à complète homogénéisation. Couvrir toute la surface de réaction. Utiliser la même pastette pour mélanger le réactif test.
8. Imprimer à la carte un mouvement de rotation pendant 3 minutes. Observer l’agglutination sous lumière normale. Ne pas utiliser de loupe.
9. Eliminer les cartes de réaction dans un désinfectant.
C. Lecture et interprétation des résultats
Résultat positif :
Un résultat est considéré comme positif s’il y a agglutination des particules de latex en moins de 3 minutes. Ceci indique la présence de Campylobacter sp.
Résultat négatif :
Un résultat est considéré comme négatif s’il n’y a pas d’agglutination et si une suspension bleue homogène reste dans la zone de test après 3 minutes de mélange. Ceci indique que le germe isolé n’est ni C. jejuni, ni C. coli ou C. lari.
Ne pas tenir compte des réactions se produisant après 3 minutes.

CONSERVATION
Conserver le coffret à 2-25°C jusqu’à la date de péremption.

BIBLIOGRAPHIE
1. Cowan, S.T. and Steel, K.J. (1965). Characters of Gram-negative bacteria. In Manual for the identification of medical bacteria. Barrow G.I. and Feltham
R.K.A. (ed.) Third Edition. Cambridge University Press.
Cambridge U.K.
2. Corry J.E.L., Post D.E., Colin P. et al. (1995) Culture media for the isolation of campylobacters. Int. J. Food Microbiol., 26, 43-76.