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GELOSE DE BASE

CODE : CM0910

500 grammes permettent de préparer 15,8 litres de milieu.

SUPPLEMENT SELECTIF

CODE : SR0161

Chaque flacon permet de supplémenter 500 ml de milieu.

PREPARATION
Verser 15,8 grammes de poudre dans 500 ml d’eau distillée. Porter doucement à ébullition jusqu’à dissolution complète en mélangeant fréquemment. NE PAS AUTOCLAVER. Refroidir à 50°C et ajouter stérilement un flacon de supplément sélectif MSRV (SR0161) reconstitué avec 2 ml d’eau distillée stérile. Bien mélanger et répartir. Laisser sécher à l’air 1 heure.

DESCRIPTION
Le milieu MSRV est basé sur la formule décrite par De Smedt et al. Ceux ci ont montré qu’il permet d’isoler plus de Salmonella que les méthodes d’enrichissement traditionnelles.^1,2 D’autres études vont aussi dans le même sens.^3,4
Le milieu MSRV constitue une méthode simple et sensible pour l’isolement des Salmonella à partir des aliments et des échantillons de l’environnement.
L’efficacité est basée sur la propriété des Salmonella de migrer dans ce milieu sélectif plus rapidement que les microorganismes mobiles de la flore associée, produisant un halo opaque témoin de la pousse.
Ce milieu est à proscrire pour les souches de Salmonella immobiles (incidence < 0,1 %5).
Le milieu MSRV est rendu sélectif par incorporation dans la base de chlorure de magnésium et de vert malachite et par addition d’un supplément contenant de la novobiocine.

UTILISATION
– Ensemencer 3 gouttes (0,1 ml) du préenrichissement (après 16 à 20 heures d’incubation) sur 3 spots séparés à la surface des boîtes de milieu MSRV.
– Incuber au maximum 24 heures à 42°C, sans retourner la boîte (Attention : ne pas dépasser ce temps d’incubation).
– La présence d’un halo opaque centré sur le point d’ensemencement constitue une présomption de Salmonella.
– Des subcultures peuvent être réalisées en prélevant sur le bord externe du halo, pour confirmer la pureté de la culture et effectuer des tests immunologiques complémentaires.

RESULTATS - LIMITES
Si l’on suspecte la présence de Salmonella immobiles, le préenrichissement doit être repiqué en parallèle sur une boîte de milieu sélectif.

CONSERVATION
Conserver le milieu déshydraté à 10–25°C, dans un endroit sec, à l’abri de la lumière, jusqu’à la date de péremption indiquée sur le flacon.
Une fois préparé, le milieu se conserve 14 jours maximum à 2–8°C, à l’obscurité.
Remarque : La base est très hygroscopique.

CONTROLE DE QUALITE
Salmonella typhimurium : ATCC® 14028 Colonies couleur paille au point d’inoculation entourées d’un halo.
Salmonella enteridis : ATCC® 13076 Colonies couleur paille au point d’inoculation entourées d’un halo.
Citrobacter freundii : ATCC® 8090 Pas de pousse ou pousse limitée.

BIBLIOGRAPHIE
1 De Smedt J.M., Bolderdijk R., Rappold H. and Lautenschlaeger D. (1986) J. Food. Prot., 49, 510-514.
2 De Smedt J.M., Bolder dijk R. (1987) J. Food. Prot., 50, 658 661.
3 De Zutter L. et al. (1991) Int. J. Food Micro., 13, 11-20.
4 De Smedt J.M. et al. (1991) Int. J. Food Micro., 13, 301-308.
5 Holbrook R., Anderson J.M., Baird-Parker A.C., Doods L.M.,Sawhney D., Struchbury S.H. and Swaine D., (1989)
Lett. Appl. Microbiol., 8, 139-142.