Oxoid - Product Detail

COMPOSITION DU COFFRET
Coffret de 100 tests
- Latex test
Particules de latex bleues sensibilisées par des anticorps de lapin dirigés contre l’antigène somatique 0157.
100 tests
- Latex de contrôle
Particules de latex bleues sensibilisées par des immunoglobulines de lapin non spécifiques.
100 tests
- Contrôle positif
Suspension d’E. coli 0157 inactivé.
25 tests
- Contrôle négatif
Suspension d’E. coli 0116 inactivé.
25 tests
- Cartes jetables DR0500
35 cartes jetables

PRINCIPE
Certaines souches d’Escherichia coli ont été impliquées dans des cas de colite hémorragique et de syndrome urémique hémolytique.
Ces souches produisent des véro-cytotoxines. Le sérotype d’E. coli reconnu comme le plus fréquemment responsable de cette pathologie est le sérotype 0157:H7.
L’isolement de ce sérotype à partir d’une selle diarrhéique et hémorragique est le signe d’une souche produisant une véro-cytotoxine.
Le test OXOID met en évidence par agglutination de particules de latex sur carte les souches d’E. coli possédant l’antigène 0157. Il est préférable d’utiliser parallèlement à ce test la gélose Mac Conkey au sorbitol (CM0813). Les souches d’E. coli 0157:H7 ne fermentent pas le sorbitol et donnent donc des colonies incolores sur ce milieu, contrairement à la majorité des autres souches d’E. coli qui fermentent le sorbitol et donnent des colonies roses caractéristiques.
La gélose Mac Conkey au sorbitol permet une première orientation. Les colonies qui ne fermentent pas le sorbitol, peuvent alors être testées avec le réactif au latex pour confirmer leur appartenance au sérogroupe 0157 et donc leur aptitude à produire une véro-cytotoxine.

MODE D’EMPLOI
A. Préparation de l’échantillon
Les colonies à tester peuvent être prélevées soit sur une gélose Mac Conkey au sorbitol (CM0813) (colonies incolores), soit sur un milieu non sélectif. Il est nécessaire de tester environ 10 colonies différentes pour augmenter la probabilité de détecter une souche d’E. coli 0157 qui peut se trouver en culture mixte avec d’autres sérotypes. L’utilisation du latex de contrôle permet de s’assurer que la souche n’est pas autoagglutinable.
B. Mode opératoire
1. Ramener les réactifs au latex à température ambiante. Bien mélanger les suspensions de latex en agitant vigoureusement après avoir vidé le compte-gouttes.
2. Déposer une goutte de latex test sur un cercle de la lame de réaction, près du bord du cercle.
3. Ajouter une goutte de solution saline à l’aide d’une pipette Pasteur. S’assurer que le latex et la solution saline ne se mélangent pas.
4. Prélever à l’oese une partie de la colonie à tester et l’émulsionner dans la solution saline de façon à obtenir une suspension fine et homogène.
5. Mélanger cette suspension et le latex test en couvrant toute la surface du cercle de réaction.
6. Imprimer à la lame un mouvement de rotation et observer l’agglutination. L’agglutination doit apparaître en une minute maximum. Ne pas utiliser de loupe pour la lecture.
7. Si aucune agglutination n’apparaît, tester une autre colonie.
8. S’il y a agglutination, tester l’autre partie de la colonie avec le latex de contrôle pour s’assurer que la souche n’est pas autoagglutinable.
9. Eliminer la carte de réaction dans une solution désinfectante.
C. Lecture et interprétation des résultats
L’agglutination du latex test en moins d’une minute signe un résultat positif et indique la présence d’E. coli 0157.
Si aucune agglutination n’apparaît en une minute, le résultat est négatif.
Les résultats ne peuvent pas être interprétés en cas d’agglutination du latex de contrôle.
Certaines souches d’E. coli s’émulsionnent difficilement dans la solution saline et peuvent donc donner une réaction filamenteuse avec le latex test et le latex de contrôle. Ce type de réaction n’est pas une véritable agglutination et ne doit pas être pris en compte.
Si cette réaction filamenteuse est trop importante pour permettre une interprétation correcte, mettre la colonie en suspension dans 0,3 ml de solution saline.
Laisser sédimenter les particules et tester le surnageant.

BIBLIOGRAPHIE
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