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MAC CONKEY AU SORBITOL AVEC BCIG (GELOSE) (SMAC-ßCIG)

CODE : CM0981

Milieu sélectif et différentiel pour la recherche d’Escherichia coli incorporant l’agent chromogène BCIG (5-bromo-4-chloro-3-indolyl-ß-D-glucuronide).

500 grammes permettent de préparer 9,7 litres de milieu.

PREPARATION
Verser 51,6 g de SMAC avec BCIG (CM0981) dans 1 litre d’eau distillée. Bien mélanger, stériliser à l’autoclave 15 minutes à 121°C et répartir.

DESCRIPTION
80 % des souches d’Escherichia coli sont sorbitol positif et approximativement 95 % des souches sont glucuronidase positive. La plupart des E. coli O157 ne sont ni capables de fermenter le sorbitol, ni capables de couper la liaison avec le chromogène BCIG.
Lorsqu’on utilise la gélose Mac Conkey au sorbitol seule (SMAC), les E. coli O157 apparaissent de couleur paille (caractère sorbitol négatif) et les E. coli sorbitol positif apparaissent en rose/rouge. Cependant, des tests de confirmation doivent être effectués pour éliminer les E. coli sorbitol négatif et glucuronidase positif.
L’addition d’un chromogène (BCIG) à 0,1 g/l. dans la gélose SMAC réduit le nombre de colonies suspectes³.
Lorsqu’on utilise la gélose SMAC + BCIG, les E. coli O157 apparaîtront de couleur jaune paille ou jaune clair par rapport aux souches d’E. coli ß-glucuronidase (+) qui peuvent apparaître bleu-vert ou pourpres².
Les autres espèces de germes Gram (-) (Pseudomonas, Proteus, Klebsiella) peuvent croître sur SMAC avec BCIG mais peuvent être aisément différenciées par l’apparence des colonies.

UTILISATION
1. Ensemencer les boîtes avec une suspension d’aliments, de selles etc…, diluée si nécessaire pour avoir des colonies séparées.
2. Incuber 24 heures à 35-37°C.
3. Examiner les boîtes en cherchant les colonies de couleur jaune-paille indiquant le caractère sorbitol (-) et ß-glucuronidase (-) des germes. Confirmer les E. coli O157 suspectes avec le test au latex E. coli O157 (DR0620) ou le test E. coli O157 Dryspot.
Si de forts taux de germes Gram (-) sont suspectés, le milieu peut être supplémenté avec le supplément céfixime-tellurite (CT) (SR0172) qui inhibera ces microorganismes pour une meilleure lecture des boîtes. Cependant, tous les germes E. coli O157 ne produisent pas de toxine et une confirmation peut être effectuée avec le test VTEC RPLA (TD0960).

CONSERVATION
Conserver le milieu déshydraté à 10-25°C jusqu’à la date de péremption indiquée sur le flacon.
Les boîtes prêtes à l’emploi peuvent être conservées 2 semaines à 2-8°C.

CONTROLE DE QUALITE
Contrôle positif :
Escherichia coli O157:H7 NCTC 12900
Contrôle négatif :
Escherichia coli (glucuronidase +) ATCC 25922
Enterococcus faecalis ATCC 19433

BIBLIOGRAPHIE
1. Thomas, A., Cheasty, T., Frost, J.A., Chart. H., Smith, H.R. and Rowe, B. (1996) Epidemiol Infect. 117, 1-10.
2. Desmarchelier, P.M. and Grau, F.H. (1997) Escherichia coli. In : Foodborne Microorganism of Public Health Significance. 5th Edition. pp. 231-264. A.D. Hocking (Ed.) AIFST (NSW Branch) Food Microbiology Group, Australia.
3. Okrend, A.J.G., Rose, B.E. and Lattuada, C.P. (1990) J. Food Prot. 53, 941-943.