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CODE : CM0651

Pour l’isolement des contaminants dans la bière.

500 grammes permettent de préparer 8 litres de milieu.

PREPARATION
Verser 62,2 g de poudre dans 750 ml d’eau distillée et porter à ébullition jusqu’à dissolution complète. Ajouter 250 ml de bière, sans dégazage, au milieu chauffé et mélanger doucement. Répartir et stériliser 10 minutes à 121°C à l’autoclave.

DESCRIPTION
La gélose Universal Beer est un milieu de base auquel on peut ajouter de la bière seule ou de la bière et du cycloheximide pour l’isolement et la culture des contaminants de la bière. Ce milieu est basé sur la formule développée par Kozulis et Page ¹ qui recommandent d’incorporer de la bière dans le milieu pour accroître sa sélectivité en stimulant la pousse des contaminants de la bière. La présence de houblon et d’alcool élimine beaucoup de contaminants atmosphériques qui ne proviennent pas des levures de culture, du moût ou de la bière, en minimisant ainsi les résultats faussement positifs.
La gélose Universal Beer Oxoid favorise la pousse des Lactobacillus, Pediococci, Acetobacter, Zymomonas et des souches de levure sauvage qui peuvent infecter la levure de culture, le moût refroidi, ou se développer durant la fermentation ou le stockage de la bière finie.

UTILISATION
La gélose Universal Beer permet d’isoler et de compter les germes contaminant la levure de culture, le moût refroidi ou la bière stockée. On peut employer soit la méthode d’ensemencement en surface, soit la méthode en boîte coulée avec des dilutions en série de l’échantillon. On incube les boîtes non seulement en aérobiose pour détecter les Acetobacter, mais aussi en anaérobiose pour détecter les Lactobacillus sp. et Pediococci sp. microaérophiles aussi bien que les Zymomonas sp. anaérobies. On incube les boîtes à 28–30°C pendant 3 jours et on les examine journellement.
Pour améliorer la différenciation des colonies, on peut ajouter au milieu avant stérilisation ² du vert de bromocrésol (20 mg/litre) et de la craie en poudre (3 g/litre). On peut voir des zones de décoloration autour de Pediococcus et de certaines colonies de Lactobacillus.
L’addition de cycloheximide à 0,001 g/litre supprime la pousse des levures et donne un milieu sélectif pour la détection des contaminants dans les cultures avec levure.

CONSERVATION
Conserver le milieu déshydraté à 10–25°C jusqu’à la date de péremption indiquée sur le flacon.
Conserver le milieu prêt à l’emploi à 2–8°C.

CONTROLE DE QUALITE
Contrôle positif :
Acinetobacter calcoaceticus ATCC® 19606
Lactobacillus fermentum ATCC® 9338
Contrôle négatif :
Saccharomyces cerevisiae ATCC® 9763 (quand on ajoute du cycloheximide au milieu)

PRECAUTIONS
Lors de la manipulation du cycloheximide, observer les précautions indiquées dans le paragraphe 2-3-8, Produits dangereux.

BIBLIOGRAPHIE
1 Kozulis J.A. and Page H.E. (1968) Proc. Am. Soc. Brew. Chem., 52-58.
2 Boatwright J. and Kirsop B.H. (1976) J. Inst. Brew., 82, 343-346.