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COFFRET POUR GROUPAGE DES STREPTOCOQUES

CODE : DR0585

Test d’agglutination au latex pour l’identification des streptocoques des groupes A, B, C, D, F et G.

COMPOSITION DU COFFRET
Coffret de 50 tests
- 6 latex sensibilisés A, B, C, D, F et G
- 1 contrôle positif polyvalent
- Enzyme d’extraction (2 x 12 ml)
- 50 cartes jetables
- Agitateurs
Les latex A, B, C, D, F, G, l’enzyme d’extraction et les cartes jetables sont disponibles séparément.
DR0586 Latex pour groupe A
DR0587 Latex pour groupe B
DR0588 Latex pour groupe C
DR0589 Latex pour groupe D
DR0590 Latex pour groupe F
DR0591 Latex pour groupe G
DR0593 Enzyme d’extraction
DR0500 Cartes d’agglutination

PRINCIPE
Lancefield ¹ a montré que la majorité des streptocoques pathogènes possédaient des antigènes spécifiques polysaccharidiques permettant leur classification en groupes. Après extraction, ces antigènes peuvent être recherchés avec des particules de latex sensibilisées par des immunoglobulines spécifiques, qui agglutinent en présence de l’antigène correspondant.
Le coffret OXOID pour groupage des streptocoques est un test d’agglutination de particules de latex permettant l’identification des streptocoques des groupes A, B, C, D, F et G. L’utilisation d’un nouveau système d’extraction enzymatique réduit considérablement le temps nécessaire à l’extraction de l’antigène et augmente sa production, particulièrement pour les streptocoques du groupe D.

MODE D’EMPLOI
A. Préparation de l’extrait
Ensemencer l’échantillon sur gélose au sang et incuber une nuit à 37°C. Noter les réactions hémolytiques des colonies suspectes.
Il est également recommandé d’effectuer une coloration de Gram et une recherche de catalase pour confirmer la présence de cocci gram positif et catalase négative.
Pour chaque culture devant être groupée :
1. Etiqueter les tubes pour tests et répartir 0,4 ml d’enzyme d’extraction dans chaque tube.
2. Prendre 2 à 5 colonies avec une anse de platine et les émulsionner dans la solution enzymatique. Si la culture n’est pas pure, éviter de prélever les contaminants évidents.
3. Incuber 10 minutes à 37°C (après 5 minutes d’incubation, il est important d’agiter vigoureusement chacun des tubes pendant 2 à 3 secondes avant de poursuivre l’incubation).
L’extrait est alors prêt à être utilisé.
B. Mode opératoire
1. Ramener les latex à température ambiante en les réchauffant dans la main. Bien homogénéiser les suspensions de latex en les agitant vigoureusement, après avoir chassé les particules de latex du bouchon compte-gouttes.
2. Déposer une goutte de chaque réactif au latex sur les cercles de la carte (DR0500).
3. Ajouter une goutte de l’extrait sur chacun des six cercles avec une pipette Pasteur.
4. Mélanger, avec les agitateurs fournis, le contenu de chaque cercle en utilisant toute sa surface (utiliser un agitateur différent pour chaque cercle).
5. Imprimer un mouvement de rotation douce à la carte. L’agglutination sur un ou plusieurs cercles doit normalement apparaître en 30 secondes. Ne pas prolonger la rotation plus d’une minute. Ne pas utiliser de loupe pour faciliter la lecture.
6. Le témoin positif doit être utilisé de la même manière pour vérifier les suspensions de latex.
7. Eliminer la carte dans une solution désinfectante.
N.B. Si on n’utilise pas toute la carte en une seule fois, on peut couper celle-ci avec des ciseaux et conserver la partie inutilisée pour un usage ultérieur.
C. Interprétation des résultats
La réaction est positive si une agglutination apparaît avec un des réactifs ou si celle-ci est plus importante avec un des réactifs qu’avec les cinq autres. Si aucune agglutination n’apparaît, la réaction est négative. Ne pas tenir compte de légères traces d’agglutinations pouvant apparaître dans les réactions négatives.

BIBLIOGRAPHIE
1. Lancefield R.C. (1938) Proc. Soc. Exp. Bio. Med. 38,473.
2. Facklam R.R. (1980) “Manual of Clinical Microbiology”, 3rd Edition. American Society for Microbiology, Washington, D.C., pp. 88-100.
3. McIllmurray M.B. (1984) Lancet, I, 1353.
4. Birch B.R., Keaney M.G.L. et Ganguli L.A. (1984) Lancet, I, 856-857.
5. Facklam R.R. et Carey R.B. (1985) “Manual of Clinical Microbiology”, 4th Edition. Eds. Lennette E.H., Balows A., Hausler W.J., Shadomy H.J., Amer. Soc. for Microbiol., Washington, D.C., pp. 154-175.
6. Kloos W.E. et Jorgensen J.H. (1985) “Manual of Clinical Microbiology”, 4th Edition, pp. 143-153.
7. Bortolussi R., Schlech W.F. et Albritton W.L. (1985) “Manual of Clinical Microbiology”, 4th Edition, pp. 205-208.