Oxoid - Product Detail

PREPARATION
Verser 65 g de poudre dans un litre d’eau distillée. Porter à ébullition jusqu’à dissolution complète. Stériliser 15 minutes à 121°C à l’autoclave. Bien agiter et répartir en boîte de Pétri stériles.

DESCRIPTION
Cette modification de la gélose de Sabouraud (Carlier1) permet la culture et la différenciation des champignons.

Carlier a montré que ce milieu donnait des résultats sûrs avec Microsporum audouini, M. canis, Trichophyton mentagrophytes, T. flavum, T. rubrum et Candida albicans. La gélose Sabouraud glucosée peut être utilisée à la place du milieu de Hodges.2 Les champignons conservent leur aspect caractéristique en culture et sont ainsi rapidement identifiés d’après les critères macroscopiques standards décrits par Sabouraud.3

Ce milieu est souvent utilisé avec des antibiotiques pour l’isolement des champignons pathogènes à partir d’échantillons contenant un grand nombre de bactéries ou d’autres champignons.
Georg et al.4 ont ajouté stérilement 0,5 g de cycloheximide, 20 000 unités de pénicilline et 40 000 unités de streptomycine par litre de milieu stérilisé à l’autoclave et refroidi. Cryptococcus neoformans, Aspergillus fumigatus et Allescheria boydii sont sensibles au cycloheximide ; Actinomyces bovis et Nocardia asteroides sont sensibles à la pénicilline et à la streptomycine.
On peut également ajouter 0,4 g de chloramphénicol et 0,5 g de cycloheximide par litre de milieu reconstitué avant autoclavage (Ajello5). Les mêmes microorganismes sont sensibles à cette association d’antibiotiques (voir supplément Dermasel SR0075).

Williams Smith et Jones6 ont utilisé la gélose de Sabouraud glucosée OXOID additionnée de 20 000 unités de pénicilline et de 0,04 g de néomycine par litre, pour la numération des levures dans l’appareil digestif des porcs.
Hantschke7 a utilisé la colistine, la novobiocine et le cycloheximide pour isoler Candida albicans. Dolan8 a utilisé la gentamicine, le chloramphénicol et le cycloheximide pour l’isolement sélectif des champignons pathogènes.

La gélose de Sabouraud glucosée OXOID peut également être utilisée comme base du milieu de Pagano-Levin pour l’isolement de Candida albicans. On ajoute 0,1 g de chlorure de triphényltétrazolium (en solution stérilisée par filtration) par litre de milieu fondu et refoidi à 55°C après autoclavage. Le milieu, additionné des antibiotiques ci-dessus, inhibe la plupart des champignons non pathogènes et des bactéries. Après 3 jours d’incubation à 25°C, les colonies de Candida albicans sont incolores ou rose pâle, alors que les autres espèces de Candida et autres champignons donnent des colonies rose foncé ou rouges. Ce test constitue un dépistage, mais d’autres critères de diagnostic doivent être étudiés pour confirmer l’identification de Candida albicans.10,11,12,13

UTILISATION
1 Ensemencer chaque échantillon en double.
2 Incuber un échantillon en aérobiose à 22–25°C, et l’autre à 37°C, pendant 5 à 30 jours. Desserrer les bouchons des tubes et assurer une bonne humidification des boîtes pour compenser la perte de vapeur d’eau. NE PAS FERMER HERMETIQUEMENT LES BOITES.
3 Examiner tous les 2 à 4 jours.
4 Noter les différents types de colonies et repiquer sur milieux appropriés pour des tests complémentaires.

CONSERVATION
Conserver le milieu déshydraté à 10–30°C jusqu’à la date de péremption indiquée sur le flacon.
Conserver le milieu prêt à l’emploi à 2–8°C.

APPARENCE
milieu déshydraté: couleur paille, poudre lisse.
Milieu préparé : gélose de couleur paille.

CONTROLE DE QUALITE
Contrôle positif :
Candida albicans ATCC® 10231 bonne croissance, colonies couleur crème
Aspergillus brasiliensis ATCC® 16404 mycelium blanc, spores noires

Contrôle négatif :
milieu non inoculé, pas de changements
Ces souches sont disponibles en Cultiloops ®.

PRECAUTIONS
Certains champignons pathogènes peuvent produire des spores infectantes facilement dispersées dans le laboratoire. Examiner de tels germes avec les précautions d’usage.

L’association cycloheximide/chloramphénicol inhibe de nombreux champignons pathogènes.4
Cependant ces antibiotiques ne neutralisent pas le mycélium de Histoplasma capsulatum, Paracoccidioides brasiliensis, Sporothrix schoenckii et Blastomyces dermatitidis lorsqu’ils sont incubés à 25–30°C14.

Le cycloheximide étant toxique, suivre les précautions d’usage avant d’utiliser ce produit.

BIBLIOGRAPHIE
1 Carlier, Gwendoline I.M. (1948), Brit. J. Derm. Syph., 60, 61-63.
2 Hodges R.S. (1928), Arch Derm. Symph., New York, 18, 852.
3 Sabouraud R. (1910), “Les Teignes”, Masson, Paris.
4 Georg, Lucille K., Ajello L. and Papageorge, Calomira (1954), J. Lab. Clin. Med., 44, 422-428.
5 Ajello, Libero (1957), J. Chron. Dis., 5, 545-551.
6 Williams Smith H. and Jones J.E.T. (1563), J. Path. Bact., 86, 387-412.
7 Antschke D. (1968), Mykosen, 11, 113-115.
8 Dolan C.T. (1971), Appl. Microbiol., 21, 195-197.
9 Pagano J., Levin J.G. and Trejo W. (1957-58), Antibiotics Annual (1957-58), 137-143.
10 Kutscher A.H., Seguin L., Zegarelli E.V., Rankow R.M., Mercadante J. and Piro J.D. (1959a), J. Invest Derm., 33, 41-47.
11 Kutscher A.H., Seguin L., Zegarelli E.V., Rankow R.M., Campbell J.B. and Mercadante J. (1959b), Antibiotics and
Chemotherapy 9, 649-659.
12 Sinski J.T. (1560), J. Invest Dermat., 35, 131-133.
13 Ridley M.F. (1960), Australian J. Dermat., 5, 209-213.
14 McDonough E.S., Georg L.K., Ajello L. and Brinkman S. (1960), Mycopath. Mycol. Appl., 13, 113-116.