Oxoid - Product Detail

CODE : CM0309

Milieu pour la détermination de la flore microbienne dans les procédés de brasserie et de fermentation pouvant être rendu sélectif pour les bactéries par l’addition de cycloheximide.

COMPOSITION	(grammes/litre)
Extrait de levure	4,0
Tryptone	5,0
Glucose	50,0
Dihydrogénophosphate de potassium	0,55
Chlorure de potassium	0,425
Chlorure de calcium	0,125
Sulfate de magnésium	0,125
Chlorure ferrique	0,0025
Sulfate de manganèse	0,0025
Vert de bromocrésol	0,022
Agar	15,0
pH 5,5 ± 0,2

500 grammes permettent de préparer 6,7 litres de milieu.

PREPARATION
Verser 75 g de poudre dans un litre d’eau distillée. Porter à ébullition jusqu’à dissolution complète. Stériliser 15 minutes à 121°C à l’autoclave. Si nécessaire, le pH peut être ajusté à 6,5 par l’addition d’une solution à 1 % de bicarbonate de sodium.

DESCRIPTION
Le milieu nutritif WL, basé sur celui de Green et Gray¹, est recommandé pour la détermination de la flore microbienne dans les procédés de brasserie et de fermentation. Il permet la différenciation des levures “sauvages” parmi les levures de brasserie.²Le milieu à pH 5,5 permet d’obtenir une numération sûre des levures de brasserie. Son ajustement à pH 6,5 facilite la numération des levures de boulangerie et de distillerie.
L’addition de cycloheximide à 0,004 g/litre inhibe la croissance des levures, le milieu devenant sélectif pour les contaminants bactériens.
Lorsque l’on fait des numérations microbiennes sur ce milieu, la durée et la température d’incubation varieront selon les produits testés et les microorganismes recherchés. Les produits de brasserie nécessitent une température de 25°C et les levures de boulangerie de 30°C.

INCUBATION
La durée peut varier de 2 à 14 jours. Les conditions d’incubation en aérobiose ou en anaérobiose dépendront des caractéristiques des microorganismes.

CONSERVATION
Conserver le milieu déshydraté à 10–25°C jusqu’à la date de péremption indiquée sur le flacon.
Conserver le milieu prêt à l’emploi à 2–8°C.

CONTROLE DE QUALITE
sans cycloheximide
Contrôle positif :
Saccharomyces cerevisiae ATCC® 9763
avec cycloheximide
Contrôle positif :
Escherichia coli ATCC® 25922
Contrôle négatif :
S. cerevisiae ATCC® 9763

PRECAUTIONS
Lors de l’emploi du cycloheximide, observer les précautions indiquées dans le paragraphe 2-3-8, Produits dangereux.

BIBLIOGRAPHIE
1 Green S.R. and Gray P.P. (1950) Wallerstein Lab. Comm., 13, 357.
2 Hall, Jean F. (1971) J. Inst. Brewing 77, 513-516.