Oxoid - Product Detail

PREPARATION
Verser 41.0 g de poudre dans 1 litre d’eau distillée. Porter à ébullition jusqu’à dissolution complète. Stériliser 15 minutes à 121°C à l’autoclave. Le milieu peut être rendu sélectif après stérilisation par acidification à pH 4.0 avec 12-15 ml d’acide lactique stérile (SR0021), après refroidissement à 50°C. Ne pas réchauffer le milieu après l’addition d’acide lactique. Bien mélanger et répartir en boîtes de Pétri stériles.

DESCRIPTION
La gélose levures et moisissures est basée sur la formulation décrite par Wickerham^1,2. Le milieu est recommandé pour l’isolement et la conservation des levures et moisissures. La gélose levures et moisissures peut être rendue sélective par l’addition d’acide afin de réduire le pH du milieu à 4 (SR0021).La gélose levures et moisissures a été maintenant formulée spécifiquement pour son utilisation dans l'industrie de brasserie, pour la détection de saccharomyces et de levures sauvages non saccharomyces en présence de levures de culture.

Le milieu MYGP+cuivre était décrit par Taylor et Marsh pour l’isolement sélectif des levures sauvages dans la bière ou les cultures de levures. Le milieu utilise les différences de sensibilités des levures de bières ou des levures de culture par rapport l’action inhibitrice du cuivre.

Cela permet aux levures sauvages de se développer sur le milieu tout en inhibant la croissance de levure de culture. Les auteurs ont reconnu que la variation des matières premières y compris les peptones, le malt, l’extrait de levures et l’agar, utilisés dans la formulation peuvent affecter notablement les performances du milieu par neutralisation de l’action inhibitrice du cuivre, entraînant la prolifération des levures sauvages par les levures de culture. Une sélection rigoureuse des matières premières par Oxoid a éliminé cette variabilité, et le milieu a été optimisé par une addition de cuivre, généralement dans la plage de 50 à 300 mg/litre en fonction de la sensibilité de la levure de culture vis-à-vis du cuivre, tel que recommandé par l'Institut des méthodes d'analyse de la brasserie⁴. Le milieu complet est recommandé pour l'examen de la qualité microbiologique des bières, des levures de fermentation.

Technique 1
1. Préparer les boîtes de gélose levures et moisissures.
2. Ensemencer la gélose en surface ou dans la masse.
3. Incuber les boîtes pendant 48-72 heures à 25-30°C.
La détection et le dénombrement des levures en présence de moisissures peuvent être facilités en combinant une procédure d’incubation anaérobie et aérobie³.
Les cultures seront initialement dans des conditions anaérobies pendant 3 jours et dans des conditions aérobies pendant 2 jours. On empêche ainsi le développement des moisissures durant la phase anaérobie.
Les moisissures dimorphiques (ex : mucor spp) peuvent former des colonies comparables aux levures durant la phase anaérobie.

Technique 2
Incuber les cultures sur boîtes ou sur membranes filtrantes pendant 3 jours à 25°C dans des conditions anaérobies strictes. Puis incuber pendant 2 jours ces mêmes cultures dans des conditions aérobies. Les levures peuvent se présenter sous forme de colonies de petite taille immédiatement après la phase anaérobie et augmenteront de taille en phase aérobie. Les moisissures peuvent croître de manière illimitée après 3 jours en aérobiose.

CONSERVATION
Conserver le milieu déshydraté à 10-30°C jusqu’à la date de péremption indiquée sur le flacon.
Le milieu prêt peut être conservé à 2-8°C jusqu’à 2 semaines.

ASPECT

Milieu déshydraté : couleur paille, poudre fineMilieu préparé : gélose de couleur paille

CONTROLE DE QUALITE
La gélose levures et moisissures peut être contrôlée à l’aide de cultures de contrôle classiques.

Contrôles positifs	Réaction après incubation
	pH 6,2	pH 4,0
Aspergillus brasiliensis ATCC® 16404 *	Bonne croissance, mycélium blanc, spores noires	Bonne croissance, mycélium blanc, spores noires
Candida albicans ATCC® 10231 *	Bonne croissance, colonies crème	Bonne croissance, colonies crème
Escherichia coli ATCC® 25922*	Bonne croissance, colonies paille	Inhibition partielle à totale

*souches disponibles en Cultiloops

PRECAUTIONS

Pour usage du diagnostic in-vitroN'utilisez pas au-delà de la date d'expiration indiquée ou si le produit est décoloré ou montre des signes de détérioration.

BIBLIOGRAPHIE
1. Wickerham L.J. (1951) U.S. Dept. Agric. Tech. Bull. No 1029, 1-19.
2. Wickerham L.J. and Rettger L.F (1939) J. Tropical Med. Hyg. 42. 174-179.
3. Taylor, G.T. and Marsh, A.S. (1984) J. Inst. Brew., 90: 134-145.
4. Institute of Brewing Methods of Analysis. 1997 Vol. 2 Microbiological. 23.45
5. De Jong J. and Put H.M.C. (1980) Biology and Activities of Yeasts. Society for Applied Bacteriology Symposium series No. 9. Skinner F.A., Passmore S.M. and Davenport R.R. (eds). Academic Press, London. Pages 289-292.