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500 grammes permettent de préparer 9,8 litres de milieu.

PREPARATION
Verser 50,6 g de poudre dans un litre d’eau distillée et porter à ébullition jusqu’à dissolution complète. Stériliser 15 minutes à 121°C à l’autoclave.
UN CHAUFFAGE PROLONGE OU EXCESSIF PEUT DIMINUER LE POUVOIR GELIFIANT DE LA GELOSE.

DESCRIPTION
La gélose au moût est un milieu mycologique à usage général, équivalent au milieu décrit par Parfitt ¹ et spécialement approprié pour la culture et la numération des levures. Le milieu qui reprend exactement la composition du moût naturel est d’une acidité optimale pour de nombreuses levures, mais inhibitrice pour la plupart des bactéries. Parfitt mit en évidence les mérites respectifs de la gélose au moût et d’autres milieux pour le dénombrement des levures et moisissures dans le beurre et recommanda, dans ce but, l’utilisation de petit-lait déshydraté, de gélose au malt ou au moût. Scarr ² utilisa une gélose au moût modifiée (“gélose osmophilique”) pour la recherche des levures osmophiles dans les dérivés du sucre. La technique de Scarr est aussi utilisée pour la recherche des levures osmophiles dans les matières premières, utilisées dans la fabrication des boissons non alcoolisées.

UTILISATION
Pour l’examen bactériologique du beurre, faire des dilutions appropriées dans la solution de Ringer au 1/4 (préparée avec les comprimés de Solution de Ringer BR0052).
Mettre 1 ml de chaque dilution dans une boîte de Pétri. Ajouter 15 ml de gélose au moût fondue, refroidie à 45–48°C. Mélanger par mouvements circulaires sur un plan horizontal. Laisser les boîtes reposer 30 à 50 minutes à température ambiante (à l’abri de la lumière). Incuber les boîtes retournées 5 jours à 25°C et compter le nombre de colonies de levures et de moisissures qui se développent.
Pour la recherche des levures osmophiles dans les dérivés du sucre, dissoudre la gélose au moût déshydratée dans un sirop contenant 35 parties de sucrose (pds/pds) et 10 parties de glucose (pds/pds) et autoclaver 20 minutes à 110°C. Inoculer et mélanger comme indiqué ci-dessus. Scarr recommande d’incuber à 27°C pendant 3–4 jours pour les levures osmophiles moins courantes.
Les colonies sur le milieu sont bien nettes et normalement opaques.

CONSERVATION
Conserver le milieu déshydraté à 10–25°C jusqu’à la date de péremption indiquée sur le flacon.
Conserver le milieu prêt à l’emploi à 2–8°C.

CONTROLE QUALITE
Contrôle positif :
Saccharomyces cerevisiae ATCC® 9763
Contrôle négatif :
Escherichia coli ATCC® 25922

PRECAUTION
Ne pas refondre la gélose solidifiée afin de ne pas détériorer le gel. La surface de la gélose est molle mais appropriée pour les inoculums.

BIBLIOGRAPHIE
1 Parfitt E.H. (1933) J. Dairy Sci., 16. 141-147.
2 Scarr, M. Pamela (1959) J. Sci. Food Agri., 10 (12) 678-681