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Milieux De Culture Déshydratés

TRICHOMONAS (MILIEU DE BASE POUR)

CODE : CM0161

Milieu pour la culture de Trichomonas vaginalis.

COMPOSITION

(grammes/litre)
Extrait de foie25,0
Glucose5,0
Chlorure de sodium 6,5
Agar1,0
pH 6,4 ± 0,2 

500 grammes permettent de préparer 13,3 litres de milieu.


PREPARATION
Verser 37,5 g de poudre dans un litre d’eau distillée. Porter à ébullition jusqu’à dissolution complète. Stériliser 15 minutes à 121°C à l’autoclave. Refroidir à 50°C. Ajouter 80 ml de sérum de cheval inactivé* et ajusté à pH 6,0. Il est possible d’inhiber la croissance bactérienne en ajoutant 1 000 unités de pénicilline et 500 µg de streptomycine ou 100 µg de chloramphénicol par ml de milieu (1 flacon de SR0078 pour 500 ml de milieu).
*Inactiver le sérum de cheval (SR0035) par un chauffage de 30 minutes à 56°C, puis ajuster à pH 6,0 avec HCl 1N, avant de l’incorporer au milieu.


DESCRIPTION
Ce milieu est basé sur la formule de Feinberg et Whittington1, utilisé pour la recherche de Trichomonas vaginalis et des Candida. Après l’étude de 1704 prélèvements génito-urinaires, ces auteurs ont montré que T. vaginalis n’aurait pas été détecté dans 23,5 % des échantillons qui n’avaient pas été mis en culture. De plus, à partir de 747 prélèvements vaginaux, 63 % des cas positifs auraient été rendus faussement négatifs sans l’utilisation du milieu pour Trichomonas.
Stenton2 a noté que le succès d’une version plus récente du milieu pour Trichomonas dépendait surtout de la qualité et du pourcentage de foie incorporé au milieu ; il a alors choisi l’extrait de foie Oxoid. Le milieu pour Trichomonas a été légèrement modifié par l’addition de 0,1 % (pds/vol) d’agar : ceci diminue la tension d’oxygène et entraîne donc une pousse plus abondante des Trichomonas. On peut obtenir une bonne croissance des Trichomonas et des Candida en culture mixte, la pousse des Candida interférant rarement sur celle des Trichomonas.


UTILISATION
Ensemencer le milieu pour Trichomonas et incuber 3 à 5 jours à 37°C. Examiner régulièrement au microscope le milieu prélevé au fond du tube et observer aussi le prélèvement à l’état frais au moment de la mise en culture.
Ce milieu convient à l’examen des prélèvements urétraux et vaginaux et des échantillons d’urine.


CONSERVATION
Conserver le milieu déshydraté à 10–25°C jusqu’à la date de péremption indiquée sur le flacon.
Conserver le milieu prêt à l’emploi à 2–8°C.


CONTROLE DE QUALITE
Contrôle positif :
Trichomonas vaginalis ATCC® 30001
Candida albicans ATCC® 10231


BIBLIOGRAPHIE
1 Feinberg J.G. and Whittington, Joan M. (1957) J. Clin.Path., 10. 327-329.
2 Stenton P. (1957) J. Med. Lab. Technol., 14 228-230.

 

 
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