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CODE : CM0085

Milieu sélectif pour l’isolement des staphylocoques pathogènes. La plupart des autres bactéries sont inhibées, sauf quelques espèces halophiles.

500 grammes permettent de préparer 4,5 litres de milieu.

PREPARATION
Verser 111 g de poudre dans un litre d’eau distillée. Porter à ébullition jusqu’à dissolution complète. Stériliser 15 minutes à 121°C à l’autoclave.

DESCRIPTION
Milieu sélectif préparé selon les recommandations de Chapman¹ pour l’isolement des staphylocoques pathogènes. Sa teneur élevée en sel inhibe la plupart des autres bactéries à l’exception de certains germes halophiles d’origine marine. Les colonies de staphylocoques coagulase positive sont entourées d’une zone jaune brillante tandis que les colonies de staphylocoques non pathogènes présentent un halo rouge pourpre.
Le milieu de Chapman est recommandé pour la recherche et la numération des staphylocoques coagulase positive dans le lait², les aliments³ et autres produits⁴.
Le milieu OXOID a été utilisé pour l’examen de viandes et de poissons.^5,6,7,8,9
L’addition de 5% (vol/vol) d’émulsion de jaunes d’oeufs (SR0047) dans le milieu de Chapman permet de détecter aussi bien la lipase des staphylocoques que la fermentation du mannitol.¹⁰ La forte concentration en sel dans le milieu clarifie l’émulsion de jaunes d’oeufs, et la production de lipase se traduit par une zone jaune opaque autour des colonies produisant cette enzyme.

UTILISATION
Ensemencer massivement les boîtes de milieu de Chapman et incuber 36 heures à 37°C ou 3 jours à 32°C (ce dernier temps étant recommandé par l’APHA³).
Les colonies de staphylocoques coagulase positive sont entourées d’une zone jaune brillante, tandis que les colonies de staphylocoques coagulase négative présentent un halo rouge ou pourpre. Repiquer les colonies suspectes sur un milieu sans excès de sel (par ex : bouillon nutritif n°2 CM0067) afin d’éviter l’interférence avec la recherche de la coagulase ou d’autres tests de diagnostic.

CONSERVATION
Conserver le milieu déshydraté à 10–25°C jusqu’à la date de péremption indiquée sur le flacon.
Conserver les boîtes prêtes à l’emploi à 2–8°C.

CONTROLE DE QUALITE
Contrôle positif :
Staphylococcus aureus ATCC® 25923
Staphylococcus epidermidis ATCC® 12228
Contrôle négatif :
Escherichia coli ATCC® 25922

PRECAUTIONS
Quelques souches de S. aureus peuvent fermenter tardivement le mannitol. Il faut réincuber les boîtes négatives pendant une nuit avant de les jeter.La présomption de S. aureus doit être confirmée par la recherche de la coagulase (Staphylase test (DR0595) ou Staphytect Plus (DR0850, DR0100)).

BIBLIOGRAPHIE
1 Chapman G.H. (1945), J. Bact., 50, 201-203.
2 Davis J.G. (1959) “Milk Testing”, 2 ed., Dairy Industries Ltd., London.
3 American Public Health Association (1966), “Recommended Methods for the Microbiological Examination of Foods” 2nd Ed., APHA Inc., New York.
4 Silverton R.E. and Anderson M.J. (1961), “Handbook of Medical Laboratory Formulae” Butterworths, London.
5 Barnes, Ella M. and Shrimpton D.H. (1957), J. Appl. Bact., 20, 273-285.
6 Thornley, Margaret J. (1957), J. Appl. Bact., 20, 286-298.
7 Bain, Nora, Hodgkiss W. and Shewan J.M. (1958), DSIR, Proc. 2nd Internat. Symp. Food Microbiol. (1957), HMSO, London,
pp. 103-116.
8 Spencer R. (1961), J. Appl. Bact., 24, 4-11.
9 Eddy B.P. and Ingram M. (1962), J. Appl. Bact., 25, 237-247.
10 Gunn B.A., Dunkelberg W.E. and Creitz J.R. (1972). Am. J.Clin. Path, 57,236–238.