Oxoid - Product Detail

Chaque flacon permet de supplémenter 500 ml de milieu.

PREPARATION
Milieu sélectif de Preston :
Verser 18,5 g de milieu de base dans 475 ml d’eau distillée. Porter à ébullition jusqu’à dissolution complète. Stériliser 15 minutes à 121°C à l’autoclave. Refroidir à 50°C. Ajouter stérilement 25 ml de sang laqué de cheval (SR0048) et un flacon de supplément de Preston (ou Preston modifié) reconstitué avec 2 ml d’acétone/eau distillée stérile (50/50). Bien mélanger et répartir.
Bouillon d’enrichissement sélectif de Preston :
Dissoudre 12,5 g de bouillon nutritif n°2 (CM0067) dans 475 ml d’eau distillée. Stériliser 15 minutes à 121°C à l’autoclave. Refroidir à 50°C ou moins et ajouter stérilement 25 ml de sang laqué de cheval
(SR0048), un flacon de supplément de Preston et un flacon de supplément de croissance (SR0084). Répartir en petits flacons de 5 ml. Ce bouillon peut être conservé 7 jours à 2–8°C.
L’espace au-dessus du liquide dans le flacon doit être le plus petit possible pour avoir des conditions microaérophiles.

DESCRIPTION
Le milieu sélectif de Preston est basé sur la formule décrite par Bolton et Robertson.¹ Le milieu est particulièrement adapté à l’isolement des Campylobacter sp. à partir de tous les types d’échantillons humains, animaux et de l’environnement.
Au cours d’études comparatives ² des milieux sélectifs de Skirrow, Butzler, Blaser et Preston, ce dernier a été trouvé comme étant le milieu permettant l’isolement maximum de Campylobacter à partir de tous les types d’échantillons testés, ainsi que le plus sélectif.
La gélose de base pour Campylobacter (CM0689) a été préparée à partir de matières premières décrites par Bolton et Robertson.¹ Elle est utilisable comme milieu de base pour les suppléments sélectifs de Blaser-Wang, Skirrow et Butzler.
Le supplément de Preston pour Campylobacter (SR0117) peut aussi être utilisé pour préparer le bouillon d’enrichissement sélectif de Preston.²
Cette technique d’enrichissement est recommandée pour les échantillons fortement contaminés et/ou contenant un faible nombre de micro-organismes viables. Le bouillon d’enrichissement de Preston additionné du supplément de croissance (SR0084E) selon la formule de George et Coll.⁴ évite l’incubation en microaérophilie.
Le supplément de Preston modifié (SR0204) contient de l’amphotéricine B à la place de la cycloheximide

UTILISATION
Méthode directe sur boîte :
1 Préparer le milieu sélectif de Preston comme indiqué.
2 Faire une suspension de l’échantillon dans 3 ml d’eau peptonée à 0,1 %.
3 Ensemencer de façon à obtenir des colonies isolées.
4 Incuber à 42°C en microaérophilie pendant 24 à 48 heures* (sachet générateur de gaz CN0025, CN0035 ou CN0020).
5 Examiner les boîtes et confirmer la présence de C. jejuni ou coli par les méthodes habituelles.
*Il est nécessaire d’incuber 48 heures s’il n’y a qu’un petit nombre de Campylobacter.
Technique d’enrichissement en bouillon :
1 Préparer le bouillon sélectif de Preston comme indiqué.
2 Faire une suspension de l’échantillon dans le bouillon d’enrichissement.
3 Incuber 24 heures à 42°C en aérobiose (le supplément de croissance SR0084 évite l’incubation en microaérophilie).
4 Faire une subculture sur le milieu sélectif de Preston.

CONSERVATION
Conserver le milieu déshydraté à 10–25°C jusqu’à la date de péremption indiquée sur le flacon.
Conserver le milieu prêt à l’emploi à 2–8°C.

BIBLIOGRAPHIE
1 Bolton F.J. and Robertson L. (1982), J. Clin. Pathol., 35,462-467.
2 Bolton F.J., Coates D., Hinchliffe P.M. and Robertson L. (1983), J. Clin. Pathol., 36, 78-83.
3 Bolton F.J., (1983), Personal communication.
4 George H.A., Hoffman P.S., Kreig N.R. and Smibert R.M., (1979), Can. J. Microbiol., 25, 8-16.