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Milieu pour le screening des Staphylococcus aureus méticilline-résistants.

GELOSE DE BASE

CODE : CM1008

SUPPLEMENT SELECTIF

CODE : SR0195E

Chaque flacon permet de supplémenter 500 ml de milieu.

PREPARATION
Verser 51,75 g de base ORSAB (CM1008) dans 500 ml d’eau distilléee et porter doucement à ébullition jusqu’à dissolution. Stériliser à l’autoclave à 121°C et ajouter stérilement le contenu d’un flacon de supplément ORSAB (SR0195), reconstitué comme indiqué ci-dessous. Bien mélanger et répartir dans des boîtes de Pétri stériles.
Pour reconstituer le supplément sélectif ORSAB (SR0195), ajouter stérilement 2 ml d’eau distillée stérile à un flacon de supplément. Mélanger doucement jusqu’à dissolution.

DESCRIPTION
La base ORSAB (Oxacilline Resistance Screening Agar) est un milieu nutritif et sélectif contenant une haute concentration en sel et en chlorure de lithium de façon à inhiber la croissance des germes non staphylocoques, ainsi que du mannitol et du bleu aniline pour la détecion de la fermentation du mannitol.
Les antibiotiques contenus dans le supplément sélectif ORSAB (SR0195) sont de l’oxacilline à 2 mg/1 pour inhiber la pousse des staphylocoques dorés méticilline sensibles (MSSA) et de la polymixine B pour inhiber la croissance d’autres germes capable de pousser dans des milieux hypersalés comme les Proteus spp.

UTILISATION
Ensemencer la boîte avec un écouvillon en effectuant des stries perpendiculaires pour décharger progressivement l’écouvillon. Incuber la boîte 24 heures à 37°C.
Repérer les colonies bleues après 24 heures. Confirmer ces colonies suspectes d’être des staphylocoques dorés méticilline résistant par le test Staphytect plus (DR0850) ou le Dryspot Staphytect plus (DR0100) et le test PLP2’ (DR0900). Mettre à réincuber pour 24 heures les boîtes négatives. Ne pas mettre à réincuber des boîtes positives.

PRECAUTIONS
Usage in vitro.

CONSERVATION
Conserver le milieu déshydraté à 10-25°C jusqu’à la date de péremption indiquée sur le flacon et à l’abri de la lumière directe.

CONTROLE DE QUALITE
Contrôle positif Cultiloops
S.aureus (souche MRSA) ATCC 43300
Contrôle négatif
S.aureus (souche MSSA) ATCC 25923
E.coli ATCC 25922